PENGECATAN BTA (Ziehl Nelson)

Prinsip

            Dinding bakteri yang tahan asam mempunyai lapisan lemak yang sukar ditembus cat,oleh pengaruh phenol (karbol) dan pemanasan,maka lapisan lemak itu dapat ditembus cat fuchsin.

Alat dan Bahan

·         Object glass

·         Ose

·         Lampu spirtus

·         Kertas saring

·         Mikroskop

·         Jembatan pengecatan

·         Kapas Alkohol

·         Minyak Imersi

Reagen

·         Fuchsin

·         Metanol

·         Methylen blue

Cara Kerja

1.      Siapkan Object glass yang bersih,kering,bebas lemak.

2.      Letakkan 1 ose suspensi kuman di tengah-tengah object glass,tipiskan secara melingkar (diameter ⁺/- 1,5 Cm).

3.      Genangi dengan cat fuchsin.

4.      Fiksasi di atas lampu spirtus (Jangan sampai mendidih,hanya sampai keluar asap).

5.      Bilas dengan air mengalir.

6.      Tetesi dengan asam alkohol sampai warna fuchsin hilang.

7.      Genangi dengan cat methylen blue selama 2 menit.

8.      Bilas dengan air mengalir,keringkan dengan kertas saring.

9.      Periksa dibawah mikroskop perbesaran 100x.

Hasil

          Kuman BTA berwarna merah.

PENGECATAN BTA (Kinyoun-Gabbet)

Prinsip

            Dinding bakteri yang tahan asam mempunyai lapisan lemak yang sukar ditembus cat,oleh pengaruh phenol (karbol) dengan kadar cat yang tingi,maka lapisan lemak itu dapat dapat ditembus cat fuchsin.

Alat dan Bahan

·         Object glass

·         Ose

·         Lampu spirtus

·         Kertas saring

·         Mikroskop

·         Jembatan pengecatan

·         Kapas Alkohol

·         Minyak Imersi

Reagen

·         Kinyoun

·         Gabbet

·         Alkohol

Cara Kerja

1.      Siapkan Object glass yang bersih,kering,bebas lemak.

2.      Letakkan 1 ose suspensi kuman di tengah-tengah object glass,tipiskan secara melingkar (diameter ⁺/- 1,5 Cm).

3.      Fiksasi di atas lampu spirtus.

4.      Letakkan diatas jembatan pengecatan.

5.      Genangi dengan cat kinyoun selama 3 menit.

6.      Bilas dengan air mengalir selama ^½ menit.

7.      Genangi dengan cat Gabbet selama 1 menit.

8.      Bilas dengan air mengalir,keringkan dengan kertas saring.

9.      Periksa dibawah mikroskop perbesaran 100x.

Hasil

            Kuman BTA berwarna merah.

 Gbr. Pengecatan BTA

PENGECATAN GRAM (Christian Gram)

Prinsip

            Kuman gram positif akan menyerap zat warna pertama (gentien violet) yang tidak akan dilepaskan pada saat pencucian alkohol,sehingga kuman tersebut tidak akan menyerap zat warna kedua (fuchsin),sehingga kuman tersebut tetap berwarna ungu.Sedangkan kuman gram negatif akan melunturkan zat warna pertama (gentien violet) pada saat pencucian alkohol dan akan menyerap zat warna kedua (fuchsin),sehingga kuman akan berwarna merah.

Alat dan Bahan

·         Object glass

·         Ose

·         Lampu spirtus

·         Kertas saring

·         Mikroskop

·         Jembatan pengecatan

·         Kapas Alkohol

·         Minyak Imersi

Reagen

·         Gentien violet

·         Lugol

·         Alkohol

·         Fuchsin

Cara Kerja

1.      Siapkan Object glass yang bersih,kering,bebas lemak.

2.      Letakkan 1 ose suspensi kuman di tengah-tengah object glass,tipiskan secara melingkar (diameter ⁺/- 1,5 Cm).

3.      Fiksasi di atas lampu spirtus.

4.      Genangi dengan cat gentien violet selama 3 menit.

5.      Bilas dengan air mengalir.

6.      Genangi dengan lugol selama 2 menit.

7.      Bilas dengan air mengalir.

8.      Cuci dengan alkohol sampai bersih,bilas dengan air mengalir.

9.      Genangi dengan cat fuchsin selama 1 menit.

10.  Bilas dengan air mengalir,keringkan dengan kertas saring.

11.  Periksa di bawah mikroskop perbesaran 100x.

Hasil

            Kuman Gram Positif berwarna Ungu. Kuman Gram Negatif berwarna merah.

Gbr. bakteri gram positif.

Gbr. bakteri gram negatif.