PENGECATAN GRAM (Christian Gram)

Prinsip

            Kuman gram positif akan menyerap zat warna pertama (gentien violet) yang tidak akan dilepaskan pada saat pencucian alkohol,sehingga kuman tersebut tidak akan menyerap zat warna kedua (fuchsin),sehingga kuman tersebut tetap berwarna ungu.Sedangkan kuman gram negatif akan melunturkan zat warna pertama (gentien violet) pada saat pencucian alkohol dan akan menyerap zat warna kedua (fuchsin),sehingga kuman akan berwarna merah.

Alat dan Bahan

·         Object glass

·         Ose

·         Lampu spirtus

·         Kertas saring

·         Mikroskop

·         Jembatan pengecatan

·         Kapas Alkohol

·         Minyak Imersi

Reagen

·         Gentien violet

·         Lugol

·         Alkohol

·         Fuchsin

Cara Kerja

1.      Siapkan Object glass yang bersih,kering,bebas lemak.

2.      Letakkan 1 ose suspensi kuman di tengah-tengah object glass,tipiskan secara melingkar (diameter ⁺/- 1,5 Cm).

3.      Fiksasi di atas lampu spirtus.

4.      Genangi dengan cat gentien violet selama 3 menit.

5.      Bilas dengan air mengalir.

6.      Genangi dengan lugol selama 2 menit.

7.      Bilas dengan air mengalir.

8.      Cuci dengan alkohol sampai bersih,bilas dengan air mengalir.

9.      Genangi dengan cat fuchsin selama 1 menit.

10.  Bilas dengan air mengalir,keringkan dengan kertas saring.

11.  Periksa di bawah mikroskop perbesaran 100x.

Hasil

            Kuman Gram Positif berwarna Ungu. Kuman Gram Negatif berwarna merah.

Gbr. bakteri gram positif.

Gbr. bakteri gram negatif.